正布尼亞病毒是一類主要通過媒介昆蟲傳播的三節段負鏈RNA病毒，其中的布尼亞韋拉病毒（Bunyamwera virus, BUNV）、施馬倫貝格病毒（Schmallenberg virus, SBV）等可引起人發熱、腦炎或家畜流產、致畸，給全球公共衛生安全帶來了嚴重威脅。艾比湖病毒（Ebinur lake virus, EBIV）是于2014年首次在兇小庫蚊中分離得到的一株正布尼亞病毒，前期研究發現該病毒對小鼠有高致病性，在人群和動物血清中可檢測到EBIV抗體，表明EBIV對人或動物具有潛在的感染風險，需加強關注。構建帶有熒光標記的EBIV，可便于進一步在EBIV的感染機制、基因功能、抗病毒藥物篩選等方面開展研究。
2022年9月21日，國際知名學術期刊Antiviral Research（《抗病毒研究》）在線發表了武漢病毒所袁志明/夏菡團隊關于帶綠色熒光標記的EBIV構建以及其用于抗病毒藥物高通量篩選的研究工作，論文題為“Efficient rescue of a newly classified Ebinur lake orthobunyavirus with GFP reporter and its application in rapid antiviral screening”（《攜帶GFP的EBIV構建及其在快速抗病毒藥物篩選中的應用》）。
該論文完成了攜帶GFP的EBIV構建和細胞感染譜研究，進一步將其應用于高通量抗病毒藥物篩選。研究結果表明攜帶GFP的EBIV可穩定傳代，與野生相比，生長趨勢一致，但是細胞毒性減弱（圖1）；可感染嚙齒類、禽類、蚊蟲類和靈長類來源的細胞系，對禽類細胞感染效率最高。該團隊進一步利用該熒光標記病毒在150種抗病毒藥物的高內涵篩選中，篩選出2種藥物（Tyrphostin A9和UNC0638），顯示細胞水平對EBIV具有有效的抑制作用（圖2）；通過時相加藥實驗發現Tyrphostin A9主要在病毒感染后起抑制作用，而UNC0638在感染前、中、后加入都可達到抑制病毒的效果。該研究將為EBIV乃至其他正布尼亞病毒屬病毒的分子水平研究，以及疫苗藥物的開發和儲備提供了有效的工具平臺。
武漢病毒所博士生任南潔、特別研究助理王飛博士為論文共同第一作者，袁志明研究員、夏菡青年研究員為本文的共同通訊作者。美國疾病預防控制中心Eric Bergeron研究員，云南畜牧獸醫科學院王靜林研究員、武漢病毒所張波研究員為該項研究的合作作者。該項研究得到國家衛生健康委員會熱帶病防治重點實驗室開放課題（2021NHCTDKFKT21007）和武漢市科技計劃（2018201261638501）等項目的資助。
圖1：攜帶GFP的EBIV與野生型EBIV的基本特性
圖2：利用攜帶GFP的EBIV開展高內涵抗病毒藥物篩選
文章鏈接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0166354222001905
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科學研究